Del 1 al 15 de diciembre de 2025 realicé una estancia científica en la Universidad de Okayama, en la Facultad de Medicina, Odontología y Ciencias Farmacéuticas, bajo la guía del Profesor Tomoyuki Honda. El trabajo se enfocó en aplicar una herramienta moderna de biología molecular, llamada CRISPR/Cas13b, que permite reducir de manera dirigida los mensajes genéticos (RNA) para estudiar los virus que pueden estar relacionados con procesos tumorales.

¿Qué virus estudié y por qué?

Trabajé con el KSHV (herpesvirus asociado al sarcoma de Kaposi), un virus relacionado con ciertos tipos de cáncer en humanos. Dentro de este virus elegimos como blanco el gen vFLIP, porque es importante para que el virus se mantenga en la célula y favorezca señales de “supervivencia” celular, lo que puede contribuir a procesos de transformación celular.

El objetivo fue comprobar si CRISPR/Cas13b podía disminuir la expresión del gen vFLIP (es decir, “apagarlo” parcialmente a nivel de RNA) usando una guía específica diseñada para reconocer ese gen.

¿Qué hice durante la estancia?

Diseñé crRNA dirigidas a vFLIP: Se definieron regiones diana en el transcrito vFLIP y se diseñaron crRNA candidatos para su evaluación, bajo el sistema de edición de RISPR/Cas13b.

Preparé el experimento en células de laboratorio: (células humanas HEK293T), que se usan frecuentemente para estudios de biología molecular.

Realicé transfección, que consiste en introducir en las células el sistema CRISPR/Cas13b y la guía (crRNA) que apunta al gen vFLIP, junto con los controles necesarios para comparar.

Luego de 48 horas, extraje el RNA y medí cuánto “mensaje” (RNA) de vFLIP quedaba usando RT-qPCR, una técnica estándar para cuantificar expresión génica.

¿Qué encontré?

Los resultados mostraron que, en las células donde se expresó vFLIP (control) se observó alta señal del gen. Sin embargo, cuando se aplicó CRISPR/Cas13b con la guía dirigida a vFLIP, la expresión de vFLIP disminuyó marcadamente, llegando a niveles cercanos a los controles basales. Esto demuestra que el sistema logró una reducción eficiente y específica del gen vFLIP en las condiciones evaluadas.

Este trabajo aporta una prueba de concepto: es posible usar CRISPR/Cas13b para reducir, de forma dirigida, un gen relevante de un herpesvirus asociado a cáncer, lo que abre la puerta a estudiar mejor cómo actúan estos virus y a explorar estrategias futuras de intervención a nivel molecular.

Comentario y proyección

El profesor Tomoyuki Honda destacó que el trabajo permitió comprobar el potencial de CRISPR/Cas13 para disminuir un mRNA viral asociado a oncogénesis, y señaló que esta aproximación podría aplicarse a otros virus oncogénicos, incluyendo el virus de la enfermedad de Marek, lo que abre oportunidades de colaboración futura.

En resumen: durante mi estancia diseñé y apliqué un enfoque CRISPR/Cas13b dirigido a vFLIP de KSHV, realicé transfección en células en cultivo y confirmé por RT-qPCR una reducción clara de la expresión del gen; como siguiente paso, me interesa continuar esta línea hacia herpesvirus aviares, con énfasis en Marek, por su impacto en la sanidad avícola.

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(*) Bióloga, doctora en Ciencias de la Salud.

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